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]]>會員卡2:任選6個生信課程,7000元/年/人
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1、生信入門基礎課:零基礎R語言繪圖+生信入門課程(可組合:轉錄組數據挖掘+代謝蛋白生信課程)
2、基因組類課程:比較基因組學+基因家族分析課程(可組合:零基礎R語言繪圖+生信入門+GWAS+遺傳進化+重測序分析課程)
3、群體類課程:GWAS+遺傳進化課程+重測序分析課程(可組合:零基礎R語言繪圖+生信入門+比較基因組+基因家族分析課程)
4、轉錄調控類課程:轉錄組數據挖掘+代謝蛋白組學+ATAC分析課程(可組合:零基礎R語言繪圖+生信入門)
5、微生物多樣性課程:微生物多樣性生信分析課程+微生物數據挖掘課程(可組合:零基礎R語言繪圖+生信入門)
本課程主要是用R代碼來介紹方法的實現,實操性強。同時,本次課程會系統性對R語言基礎進行講解,讓大家對R語言形成一個整體的思路。現在開源的R代碼很多,了解了基礎構建,后面拿到開源的代碼后就可以自己知道怎么修改,這些參數是什么了。對于后期R語言的自學是一個很好的敲門磚。
本課程主要針對沒有接觸過生信,而且沒有具體學習的生信方向,想了解入門生信的同學們。本課程涉及生信入門基礎的了解知識、常用的在線工具、以及涉及的幾種語言基礎介紹,讓你了解生信大概內容,從而根據這些內容了解自己想學習的方向,進而一步步細化去學習研究。
本課程主要針對轉錄組結果數據的挖掘分析,將從常用的轉錄組生信分析基礎入手,帶領大家學習轉錄組分析中常用的分析方案、個性化分析軟件及其實現方法,其中包含熱點的WGCNA分析,熱圖繪制,差異基因分類分析等繪圖分析。滿足轉錄組文章常見分析展示需求。
本課程主要針對代謝和蛋白組學結果數據進行挖掘分析,從代謝和蛋白組學結果文件入手,手把手教授個性化繪圖及分析技巧。
本課程主要從基礎生信操作開始,從已發表的NG、NC等高水平文章入手,帶領大家學習并實際操作高分文章中圖形及分析是如何實現的,學習比較基因組學常用的分析方法,從而滿足文章后期發表的需求。
近年來基因家族的生物信息學分析已經成為大家研究的熱點,目前已經表明許多重要的基因,如一些轉錄因子,都是以基因家族的形式存在。本課程系統的對基因家族進行了生物信息分析,讓大家更加深入學習了解基因家族分析研究,從而進一步豐富我們研究的內容,提升文章檔次,實現科研成果的快速產出。
本課程主要從實踐入手,重點講解 GWAS 分析中用到的各種分析方法與常用分析軟件。包括群體結構分析、主成分分析、親緣關系分析、連鎖不平衡分析、單體型分析等內容。從原始數據開始,逐步完成分析內容,并對分析內容進行整理與挖掘,將數據轉化成更直觀的圖形來展示最終的分析結果。若您想做、準備做或正在做GWAS相關的項目,那這個課程就很適合您,即可學會自己分析,同時了解分析過程中的參數設置,可以很好協助您的論文寫作。
本課程將微生物多樣性生信分析中的每一個步驟以及每一步驟所涉及的參數都很明確的列了出來,詳細為大家進行講解及實操演示,幫助大家更好的了解學習微生物多樣性分析的整個過程。
本次課程主要針對微生物多樣性數據的后期挖掘繪圖,主要利用R語言來進行微生物多樣性相關圖形的繪制,從而實現自己可以分析繪制圖形,更重要的是自己可以根據不同雜志的要求,很快得出對應的圖形。
本課程主要針對基于二代及三代測序的重測序分析。以實際操作為主,從序列比對開始到突變位點的分析及應用。包括常用的分析方法及工具軟件(BWA、GATK、Plink等)。讓大家能夠快速上手有關重測序的相關分析并為后續與突變相關的高級分析打下良好的基礎。
本次課程主要講解群體遺傳進化分析中常見分析內容以及定制化繪制相關圖形,同時涵蓋高級分析,基因流、分化時間、群體歷史動態三塊高級分析內容。本課程主要面向初中級,且對遺傳進化分析有需求的老師。
本課程主要從技術原理、實驗步驟、生物信息學分析、文獻分享四大內容向大家介紹ATAC-Seq技術。同時,本課程還涉及專門的生物信息學實操課程,帶領大家學習ATAC-Seq基本分析流程,其中包括數據質控、Peak Calling、Motif分析等。從而幫助大家將ATAC-Seq運用在自己的課題當中。
基于樣品中的物種組成及豐度信息推測樣品中表型類型和功能組成及差異。包含PICRUSt2功能預測、FAPROTAX功能預測、BugBase表型預測、Tax4Fun2功能預測和真菌FunGuild表型預測。
PICRUSt1軟件依賴于Greengene數據庫進行物種比對、功能數據輸出。而Greengene數據庫在2013年之后就停止了更新,距今為止已有7年。隨著時間的推移,大量微生物基因組數據測序獲得,而停止更新的Greengene數據庫限制了PICRUSt的功能預測范圍。對于近年來測序獲得微生物功能功能信息無法進行預測,滿足不了當前的研究需求,為了補上這塊滿足科研工作者的需求,PICRUSt團隊于近期升級了軟件,正式公布了PICRUSt2。
1)將待預測的OTU代表序列置于軟件中已有的系統發育樹中,而不是直接對OTU序列進行分類學注釋;
2)不再基于GreenGene 16S數據庫進行功能預測,其用于預測的參考基因組數據庫相比先前也已擴大了10倍以上
參考文獻:Douglas G M, Maffei V J, Zaneveld J, et al. PICRUSt2: An improved and extensible approach for metagenome inference. bioRxiv, 2019.
功能組成分析:統計各樣品在不同分類層級上的功能組成。
注:橫坐標為樣品名稱;縱坐標為功能相對豐度百分比。
功能差異分析:統計各樣品或者各組在不同分類層級上的功能差異。
注:圖中不同顏色代表不同的樣品或分組。左圖所示為不同功能在兩個樣品或者兩組樣品中的豐度比例,中間所示為95%置信度區間內功能豐度的差異比例,最右邊的值為校正后p值。
FAPROTAX較適用于對環境樣本的生物地球化學循環過程(特別是碳、氫、氮、磷、硫等元素循環)進行功能注釋預測。FAPROTAX是根據已發表的文獻手動構建的數據庫,它把原核微生物的分類和代謝等功能對應起來,目前收集自4600多個原核微生物的80多個功能分組7600多條功能注釋信息。
參考文獻:Louca S, Parfrey L W, Doebeli M. Decoupling function and taxonomy in the global ocean microbiome[J]. Science, 2016, 353(6305): 1272-1277.
BugBase是一種預測復雜微生物組內功能途徑的生物水平覆蓋以及生物可解釋表型的方法。BugBase首先通過預測的16S拷貝數對OTU進行歸一化,然后使用提供的預先計算的文件預測微生物表型。包括以下七方面:革蘭氏陽性 (Gram Positive)、革蘭氏陰性 (Gram Negative)、生物膜形成 (Biofilm Forming)、致病潛力 (Pathogenic Potential)、移動元件含量 (Mobile Element Containing)、氧的利用 (Oxygen Utilizing)、氧化脅迫耐受 (Oxidative Stress Tolerant)。
參考文獻:Ward T, Larson J, Meulemans J, Hillmann B, Lynch J, SidiropoulosD,Spear J, Caporaso G, Blekhman R, Knight R, Fink R, Knights D. 2017.BugBase predicts organism level microbiome phenotypes. bioRxiv.
Tax4Fun全面升級為Tax4Fun2.評估微生物群落的功能和冗余度是環境微生物學的主要挑戰。Tax4Fun2可基于16S rRNA基因序列快速預測原核生物的功能譜和功能冗余。通過合并用戶定義的、特定于棲息地的基因組信息,可以顯著提高預測功能圖譜的準確性。
優點:
(1)不再局限于僅SILVA的特定版本注釋的OTU豐度表,允許直接以OTU代表序列作為輸入,通過與指定參考數據庫的比對實現物種注釋。除了Tax4Fun2提供的已構建好的參考集(相比之前大幅擴大),也允許我們提供自定義的參考集,使用非常靈活。
(2)側重于原核數據,但也可以合并真核數據。
(3)提供了計算特定功能冗余的方法,對于預測特定功能在環境擾動期間丟失的可能性至關重要。
(4)精度和穩定性顯著提升。
參考文獻:Wemheuer F, Taylor J A, Daniel R, et al. Tax4Fun2: a R-based tool for the rapid prediction of habitat-specific functional profiles and functional redundancy based on 16S rRNA gene marker gene sequences. bioRxiv, 2018.
FUNGuild(Fungi Functional Guild)是一種可用于由生態協會分類學解析真菌的工具,用簡單而一致的方法將大型序列庫分類為具有生態意義的類別。根據營養方式將真菌分為12類,然后構建了一個真菌分類和功能分組(guild)之間的數據庫,通過這個數據庫你就可以對真菌進行功能分類。
病理營養型(pathotroph):通過損害宿主細胞而獲取營養(包括吞噬型真菌phagotrophs)。
共生營養型(symbiotroph):通過與宿主細胞交換資源來獲取營養。
腐生營養型(saprotroph):通過降解死亡的宿主細胞來獲取營養。包括動物病原菌(animal pathogens)、叢枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungi)、外生菌根真菌(ectomycorrhizal fungi)、杜鵑花類菌根真菌(ericoid mycorrhizal fungi)、葉內生真菌(foliar endophytes)、地衣寄生真菌(lichenicolous fungi)、地衣共生真菌(lichenized fungi)、菌寄生真菌(mycoparasites)、植物病原菌(plantpathogens)、未定義根內生真菌(undefined root endophytes)、未定義腐生真菌(undefined saprotrophs)和木質腐生真菌(wood saprotrophs)。
參考文獻:Nguyen NH, Song Z, Bates ST, Branco, S, Tedersoo L, Menke J, Schilling JS, Kennedy PG. 2016. FUNGuild: an open annotation tool for parsing fungal community datasets by ecological guild. Fungal Ecology 20:241-248.
在做完16S、18S或ITS等微生物多樣性研究后,我們常常還會想進一步了解微生物群落的功能。通常情況下,會采用宏基因組、宏轉錄組或宏代謝組等方法深入分析,但相對于擴增子測序,宏基因組等測序手段的價格還是相對較高,因此需要從已測完的樣本中再挑選合適的樣本進行宏基因組測序。可利用microPITA進行樣品預測,挑選出合適的樣品。該分析是基于大量微生物多樣性的數據,根據不同指標篩選出代表性樣本,以便于開展開展后續研究。
類型 | 方法 | 含義 | 樣本特點 |
無監督方法 | diverse | 選擇α多樣性最高的樣本 | 生態多樣性高 |
features | 根據目標物種挑選樣本 | 針對特定物種 | |
extreme | 選擇β多樣性距離最遠的樣本 | 極端樣本 | |
representative | 最能反映整體距離差異的樣本 | 核心樣本 | |
有監督方法 | Distinct | 根據表型/分組特征,挑選組間β多樣性距離最大的樣本 | 依據表型/分組特征,選擇極端樣本 |
Discriminant | 根據表型/分組特征,挑選離分組中心最近的樣本 | 依據表型/分組特征,挑選核心樣本 |
參考文獻:Tickle TL, Segata N, Waldron L, Weingart U, Huttenhower C. Two-stage microbial community experimental design. ISME J. 2013 Dec;7(12):2330-9. doi: 10.1038/ismej.2013.139. Epub 2013 Aug 15. PMID: 23949665; PMCID: PMC3834858.
微生物群落生態學的一個主要目標是了解構成跨時空物種豐度模式的過程。確定性和隨機性兩種類型的過程會影響群落的聚集。確定性過程與生態選擇相關,隨機過程包括不可預測的擾動、概率性的散布和隨機的出生-死亡事件等,這些變化不是由環境決定的適應性結果。通過零模型量化群落的絕對系統發育距離與隨機系統發育距離的偏離度,偏離程度越大,群落受確定性因素的影響越大,偏離度越小,群落受隨機性因素的影響越大。通常使用βNTI(最近種間親緣關系指數)以評估不同時空尺度下隨機性和確定性過程對微生物群落組裝的影響。
其中,| βNTI |>2表示觀察到的兩個群落之間的更替主要由選擇控制,其中βNTI>+2與變量選擇一致,而βNTI<-2表示同質選擇。因此,| βNTI |<2意味著一組群落的更替受擴散限制、均勻化擴散或未消除過程的控制。為了理清這些過程,Raup-Crick矩陣(RCbray)基于群落的標準Bray-Curtis矩陣構建,提供有關所觀察到的流動程度是否明顯偏離預期的信息。這個值等于觀測到的Bray-Curtis和零分布之間的偏差,范圍是-1到+1。| RCbray |<0.95可以解釋為終止過程的影響。反過來,擴散限制加上漂移導致大于預期的周轉率(RCbray>+0.95),而RCbray<-0.95則表明群落組成的周轉率主要受均勻擴散控制。
參考文獻:Jizhong, Zhou, Daliang, et al. Stochastic Community Assembly: Does It Matter in Microbial Ecology[J]. Microbiology & Molecular Biology Reviews, 2017.
]]>發表期刊:Plant Biotechnology Journal
發表時間:2020年7月12
影響因子:8.1
研究內容:棉花花芽分化
研究對象:兩個早熟品種,兩個晚熟品種;每個品種6個時期
研究方法:轉錄組測序
陸地棉(Gossypium hirsutum L.)是世界上最重要的纖維作物。在我國黃河流域和長江流域棉區,實現早熟棉在小麥或者油菜后直播可以提高復種指數。而在西北內陸棉區,春季氣溫低,秋季枯霜早,早熟棉既能提高棉花的霜前花率,還可以改善棉花品質。花芽分化是影響短季棉品種早熟的重要性狀,是棉花現蕾期、開花期和成鈴期發育的基礎,花芽分化直接影響開花時間。花芽分化是植物從營養生長向生殖生長過渡的標志。當進入生殖生長時,側芽變成花芽,花芽發育成果枝。果枝分化決定了開花量、生殖能力和棉花產量。因此,早熟性狀及早熟棉品種在生產上顯得尤為重要。
1、棉花莖尖的形態發育
2、棉花不同發育階段的72個RNA文庫的轉錄組譜
3、加權基因共表達網絡分析(WGCNA)
4、棉花從營養生長向生殖生長轉換相關基因的鑒定
5、GhCAL在調節從營養生長到生殖生長的轉換的功能驗證
然后作者利用高分文章利器:WGCNA分析,進行數據深度挖掘和整理,推薦大家使用百邁客云平臺小工具WGCNA模塊,可以出來和作者同樣高大上的圖片。
然后作者根據一系列的功能驗證最終鎖定控制花芽分化的基因,再次推薦大家使用百邁客轉錄組個性化(所有基因挖掘,差異基因挖掘,基因結構挖掘)三大模塊和小工具(108款分析繪圖工具),下一篇高分文章就是你!
作為一個科技服務工作者,自然能夠明白每一位老師的痛處和難點,不過現在都2020年了,再也不是一個轉錄組1萬元的天價了,那么現在從原始的測序數據到數據挖掘直至最后完美的SCI論文圖表,究竟是怎么出來呢?
雖然君子遠庖廚,不過今天小編將為您帶進后廚,為您娓娓道來。
任務提交后,根據樣本數據量,一般24-48h左右大家就可以看到一份完整的分析結題報告和分析數據了。
講到這里可能有人會問:難道就這么簡單?那人家好幾篇文章里面那些高大上的圖片都是大神用小工具做的嗎,小編可以負責任的告訴你們,不是的!我們還有很多隱藏功能:
第一:基因檢索。(小編選的蛋白是PPR蛋白,從4萬多基因里面篩選出來60個PPR蛋白相關的基因,然后根據60個基因做GO分類圖)。
第二:WGCNA分析。這個分析主要是將基因模塊與表型數據或者表型樣本進行關聯,從而快速的鎖定一批候選基因。
運行后打開是下圖這樣的,對此圖有疑惑的可以點擊圖片左側的攝像頭。
第三:最近很火的差異基因表達趨勢分析
第四:108款分析繪圖工具(73款常用工具免費使用)。
具體這些工具如何使用?百邁客云還有哪些隱藏功能呢?歡迎大家持續關注,小編會定期為大家進行分享。
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百邁客云包含農學和醫學兩大類分析平臺,醫學分析平臺主要針對人、鼠數據的分析,包含:轉錄組、非編碼RNA、單基因病外顯子、腫瘤外顯子、重測序等數據分析,以及全轉錄組聯合分析;農學分析平臺可以應用到更多的物種,涵蓋轉錄組、非編碼RNA、微生物、蛋白、代謝等數據的分析,以及全轉錄組聯合分析等。點擊左側導航分析->農學或者醫學打開分析平臺列表頁面,點擊選擇您想要使用的分析平臺,打開其詳細介紹頁面,該頁面可以看到該平臺的應用領域“平臺介紹“技術背景“案例“課堂“版本記錄,點擊打開軟件即可進入到參數頁面。
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導入數據之后,可以根據自己的需要修改樣品ID,由于此處設置的ID會體現在分析報告和分析結果中,因此請慎重考慮后再設置,分析完成后不可再次修改。如果平臺上還沒有您自己的數據,請參考數據上傳先將您的數據傳到云平臺上。
轉錄組組裝方式決定了后續Unigenes庫的構建和表達定量的策略以及分析結果的可靠性.根據實際情況選擇轉錄組組裝方式。分開組裝是對每個樣品數據單 獨組裝;合并組裝是將所有樣品放在一起組裝;分組組裝適合于不同品種(或者是變異種)的組裝,將相同品種的樣品合并組裝,然后將每組的組裝結果 進行合并去冗余。合并組裝獲得的Unigene庫更完整、冗余度更低,因此Trinity官方亦推薦使用合并組裝,以便進行后續的表達定量和差異表達分析.
為了提高注釋分析的效率(縮短比對比對時間)以及獲得有效的注釋信息,在選擇注釋物種時,應盡量選擇包含物種最確切的數據庫.(如果分析物種為真菌類,一定要選擇真菌選項,否則會影響組裝效果)
根據實驗方案設計以及樣品信息,進行分組的設置,流程據此進行差異比較分析,此處只支持兩組間比較,可添加多個差異分組。FDR值一般推薦選擇0.01,差異倍數閾值一般推薦選擇(此處的參數和差異分組在后期報告個性化中可再次進行修改)
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為了方便后面的聯合分析內容,需要將各RNA項目里的數據按照對應關系統一編號,有幾組對應關系則在左側添加幾組,再從右側的lncRNA樣品池和miRNA樣品池中選擇對應的樣本添加到分組。其中默認按鈕可以按照數字的順序快速添加對應關系。
Lib_type為窗體頂端
根據實驗方案設計以及樣品信息,進行分組的設置,流程據此進行差異比較分析,此處只支持兩組間比較,可添加多個差異分組。
DEseq2軟件適用于有生物學重復的項目,edgeR適用于無生物學重復的項目,選擇第一個,系統會自動識別項目類型選擇對應的軟件
點擊報告右上角的項目結果下載,可以選擇下載HTML報告、PDF報告和結果數據(尾款結清后)。HTML報告只包括分析報告的html文件及一個src文件夾,展示了部分結果;PDF報告是根據HTML報告轉換而來,方便您進行報告打印;結果數據包含了項目中所有結果文件,一般比較大,會通過FTP進行下載
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根據實驗方案設計以及樣品信息,進行分組的設置,流程據此進行差異比較分析,此處只支持兩組間比較,可添加多個差異分組。
根據實驗方案設計以及樣品信息,進行分組的設置,流程據此進行差異比較分析,此處只支持兩組間比較,可添加多個差異分組。(此處的參數和差異分組在后期報告個性化中可再次進行修改)
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代謝定量文件:針對鑒定到的代謝物進行定量的結果表格。制表符分隔的文本文件,第一列為代謝物ID,其他列為樣品的表達量。對格式不清楚的可點擊查看示例下載示例文件。(百邁客項目的結果文件會直接推送到客戶賬號下,文件夾名稱為合同編號,可直接導入使用)
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(其中vip值采用了正交偏最小二乘法判別分析(OPLS-DA),該分析會給每個代謝物一個變量投影重要度VIP值,值越大說明代謝物的差異越顯著)
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